所謂微生物監(jiān)測(cè)是指用微生物學(xué)的方法對(duì)不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行定期的抽樣檢查,以確定該等級(jí)動(dòng)物是否感染了某些病原體。
因此,微生物學(xué)監(jiān)測(cè)是一個(gè)群體的、流行病學(xué)上的概念,它是通過從一個(gè)群體中定期抽取少量樣本進(jìn)行檢測(cè),從而判斷整個(gè)群體中某一疾病流行情況的一種方法。
那具體是怎樣檢測(cè)的呢?
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)一般采用設(shè)置“哨兵動(dòng)物”的方法。
所謂的“哨兵動(dòng)物”是指為微生物監(jiān)測(cè)所設(shè)置的指示動(dòng)物。哨兵動(dòng)物一般采用免疫功能正常的清潔級(jí)或SPF級(jí)動(dòng)物。
哨兵動(dòng)物用于監(jiān)測(cè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)室內(nèi),以及免疫缺陷動(dòng)物的生產(chǎn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中某些病原微生物的感染情況。
那么什么樣的動(dòng)物才能設(shè)置為哨兵動(dòng)物呢?
目前針對(duì)哨兵動(dòng)物并沒有統(tǒng)一實(shí)行的國(guó)際或國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn),主要是根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要需求來設(shè)置和使用。
因此對(duì)哨兵動(dòng)物的選擇上會(huì)有所不同,但主要方向上應(yīng)該遵循以下要素:
1、必須無菌或不攜帶有待監(jiān)測(cè)的特定病原以及抗體;
2、如果哨兵動(dòng)物和被監(jiān)測(cè)動(dòng)物來自不同的繁殖群,則需要選擇已知微生物狀態(tài)的動(dòng)物作為哨兵動(dòng)物;
3、盡可能與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物群的品系相同,但根據(jù)監(jiān)測(cè)目的的不同,可選擇不同品系的哨兵動(dòng)物;
4、免疫反應(yīng)正常的適齡動(dòng)物。適齡動(dòng)物必須能反應(yīng)出被監(jiān)測(cè)動(dòng)物的健康狀況,一般選用4-8周齡的鼠。
此外哨兵動(dòng)物進(jìn)場(chǎng)前必須隔離觀察和監(jiān)測(cè),這些都有助于減少經(jīng)哨兵動(dòng)物傳入的病原,這對(duì)免疫缺陷動(dòng)物尤其重要。
為減少動(dòng)物間的打斗,尤其是雄性動(dòng)物為爭(zhēng)奪資源的打斗行為,接觸式哨兵動(dòng)物一般選用雌性動(dòng)物比較容易與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物群相容。
監(jiān)測(cè)過程中哨兵動(dòng)物與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物之間的接觸方式主要分為間接接觸和直接接觸。
間接接觸常用于監(jiān)測(cè)經(jīng)排泄物傳播的疾病,被監(jiān)測(cè)動(dòng)物數(shù)量較多,也用于監(jiān)測(cè)設(shè)備或運(yùn)輸材料是否帶有病原。
間接接觸法中最常用的是舊墊料法,即每次換墊料時(shí),將被監(jiān)測(cè)籠盒內(nèi)取出約2盎司(約50g)墊料,放入哨兵動(dòng)物籠盒內(nèi),或使用100%舊墊料。
為了保證有足量的墊料滿足動(dòng)物筑巢行為,也可加入一些新的墊料,但至少要保證50%的墊料 是舊墊料。
直接接觸,即將哨兵動(dòng)物直接放入被監(jiān)測(cè)動(dòng)物群中,可監(jiān)測(cè)小范圍內(nèi)的經(jīng)氣溶膠或排泄物,分泌物傳播的疾病。
該方法可以有效的檢出一些經(jīng)氣溶膠和排泄、分泌物傳播的病原。
為監(jiān)測(cè)動(dòng)物群中病原微生物,必須對(duì)哨兵動(dòng)物定期進(jìn)行檢測(cè)。
哨兵鼠監(jiān)測(cè)范圍適用于以下幾種場(chǎng)景:動(dòng)物入場(chǎng)前監(jiān)測(cè)、動(dòng)物入場(chǎng)后監(jiān)測(cè)以及動(dòng)物運(yùn)輸和設(shè)施監(jiān)測(cè)。
在用哨兵動(dòng)物對(duì)環(huán)境設(shè)施進(jìn)行監(jiān)測(cè)時(shí),根據(jù)檢測(cè)目的的不同來設(shè)置哨兵動(dòng)物,若被監(jiān)測(cè)設(shè)施有氣流和氣壓的設(shè)置,要求在氣流進(jìn)氣口處和排氣口處都放置哨兵動(dòng)物進(jìn)行檢測(cè)。
對(duì)于哨兵動(dòng)物的檢測(cè),至少每季度檢測(cè)一次,另外也需要根據(jù)當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境和研究需要增加檢測(cè)的頻率。
通常檢測(cè)方法有以下幾種:
1、細(xì)菌學(xué)檢測(cè):取樣—細(xì)菌分離—可以菌落生化鑒定—血清學(xué)反應(yīng)
2、病毒學(xué)檢測(cè):血清學(xué)檢測(cè)病毒抗體—分離病毒
3、寄生蟲檢測(cè):
體外寄生蟲:透明膠紙黏取法、拔毛鏡檢法等;
體內(nèi)寄生蟲:分泌物涂片法、組織剖面壓印法等。
此外,發(fā)病和死亡的動(dòng)物必須剖檢,這是在常規(guī)檢測(cè)之外必須要做的,剖檢結(jié)果將指導(dǎo)是否要增加檢測(cè)頻率或者增加被檢動(dòng)物的數(shù)量。
當(dāng)然哨兵鼠只是眾多實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)方法的一種,如果整個(gè)系統(tǒng)中飼養(yǎng)的動(dòng)物都是同一品系、相同健康標(biāo)準(zhǔn)(如生產(chǎn)繁殖群)、且生產(chǎn)成本并不高的動(dòng)物群時(shí),可采用隨機(jī)抽檢的方法。
向默默付出的哨兵鼠和默默付出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)者致敬?。?/p>
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