通過(guò)飲食誘導(dǎo)的大/小鼠疾病模型種類(lèi)繁多,且同一種疾病模型可能有不同的模型飼料,本文針對(duì)較為常見(jiàn)的幾種大/小鼠模型及對(duì)應(yīng)的模型飼料說(shuō)明其成模判定方法,以供參考。
肥胖模型——高脂高糖飼料
造模周期:8-10周
成模判定:實(shí)驗(yàn)組體重超過(guò)對(duì)照組20%(簡(jiǎn)單判定)
胰島素抵抗模型——高脂高糖飼料
造模周期:6-8周
成模判定:① 空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)測(cè)定:動(dòng)物禁食5-6h,取血測(cè)FBG和FINS,計(jì)算胰島素敏感指數(shù)(ISI),評(píng)估胰島素抵抗的程度?!緇SI=In(FBG*FINS)-1】
② 口服糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT):50%葡萄糖(2g/kg)空腹灌胃,割尾取血,檢測(cè)灌胃0,30,60,90,120分鐘血糖。
③ 多組間比較采用單因素方差分析,P<0.05即有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明建模成功。
ニ型糖尿病模型——高脂高糖飼料
造模周期:6-8周
額外干預(yù):STZ(鏈脲佐菌素)注射30mg/kg三次
成模判定:在胰島素抵抗基礎(chǔ)上,以2次空腹血糖≥11.1mol/L和隨機(jī)血糖≥16.7mol/L為二型糖尿病成模標(biāo)準(zhǔn)。
非酒精性脂肪肝模型——高脂高糖飼料
造模周期:12周
成模判定:① 肝組織HE染色,用10%的中性甲醛溶液固定肝臟組織,脫水、包埋后,進(jìn)行常規(guī)HE染色。光學(xué)顯微鏡下,肝細(xì)胞脂肪變性占1/3以上視為脂肪肝。
② 血清生化指標(biāo):檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、總?cè)8视?TG)的含量。
③ 生理學(xué)指標(biāo):肝指數(shù)=肝臟濕重(g)/體重(g)*100%.
非酒精性脂肪肝炎模型——蛋氨酸膽堿缺乏飼料
造模周期:8周
成模判定:① 肝組織HE染色,用10%的中性甲醛溶液固定肝臟組織,脫水、包埋后,進(jìn)行常規(guī)HE染色。光學(xué)顯微鏡下,肝細(xì)胞脂肪變性占1/3以上且伴隨炎癥視為脂肪肝炎。
② 血清生化指標(biāo):檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、總?cè)8视?TG)的含量。
③ 生理學(xué)指標(biāo):肝指數(shù)=肝臟濕重(g)/體重(g)*100%.
動(dòng)脈粥樣硬化模型——高脂高膽固醇飼料
造模周期:8-12周
成模判定:① 血清生化指標(biāo):檢測(cè)血清中總膽固醇(TC)、總?cè)8视?TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量。
② 主動(dòng)脈弓油紅O染色:分離主動(dòng)脈弓縱向剪開(kāi)主動(dòng)脈,油紅O染色后在顯微鏡下觀(guān)察血管斑塊情況。
高膽固醇血癥模型——高脂高膽固醇飼料
造模周期:8周
成模判定:與對(duì)照組相比,模型組TC、TG和LDL-C水平顯著升高(P<0.05),HDL-C水平顯著下降(P<0.05),視為高膽固醇血癥。
取血和測(cè)定的要求:① 取血時(shí)間應(yīng)在動(dòng)物空腹?fàn)顟B(tài),且在上午進(jìn)行。
② 集中短時(shí)間內(nèi)取血:由于血脂的24小時(shí)節(jié)律,取血應(yīng)短時(shí)間內(nèi)對(duì)所有動(dòng)物集中取樣,避免因先后取血造成的血脂差異。
③ 血樣測(cè)定時(shí)間:取血樣后應(yīng)對(duì)新鮮血樣標(biāo)本即時(shí)或當(dāng)天測(cè)定。