通過飲食誘導的大/小鼠疾病模型種類繁多,且同一種疾病模型可能有不同的模型飼料,本文針對較為常見的幾種大/小鼠模型及對應的模型飼料說明其成模判定方法,以供參考。
肥胖模型——高脂高糖飼料
造模周期:8-10周
成模判定:實驗組體重超過對照組20%(簡單判定)
胰島素抵抗模型——高脂高糖飼料
造模周期:6-8周
成模判定:① 空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)測定:動物禁食5-6h,取血測FBG和FINS,計算胰島素敏感指數(shù)(ISI),評估胰島素抵抗的程度?!緇SI=In(FBG*FINS)-1】
② 口服糖耐量實驗(OGTT):50%葡萄糖(2g/kg)空腹灌胃,割尾取血,檢測灌胃0,30,60,90,120分鐘血糖。
③ 多組間比較采用單因素方差分析,P<0.05即有統(tǒng)計學意義,表明建模成功。
ニ型糖尿病模型——高脂高糖飼料
造模周期:6-8周
額外干預:STZ(鏈脲佐菌素)注射30mg/kg三次
成模判定:在胰島素抵抗基礎上,以2次空腹血糖≥11.1mol/L和隨機血糖≥16.7mol/L為二型糖尿病成模標準。
非酒精性脂肪肝模型——高脂高糖飼料
造模周期:12周
成模判定:① 肝組織HE染色,用10%的中性甲醛溶液固定肝臟組織,脫水、包埋后,進行常規(guī)HE染色。光學顯微鏡下,肝細胞脂肪變性占1/3以上視為脂肪肝。
② 血清生化指標:檢測血清中谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、總三酰甘油(TG)的含量。
③ 生理學指標:肝指數(shù)=肝臟濕重(g)/體重(g)*100%.
非酒精性脂肪肝炎模型——蛋氨酸膽堿缺乏飼料
造模周期:8周
成模判定:① 肝組織HE染色,用10%的中性甲醛溶液固定肝臟組織,脫水、包埋后,進行常規(guī)HE染色。光學顯微鏡下,肝細胞脂肪變性占1/3以上且伴隨炎癥視為脂肪肝炎。
② 血清生化指標:檢測血清中谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、總三酰甘油(TG)的含量。
③ 生理學指標:肝指數(shù)=肝臟濕重(g)/體重(g)*100%.
動脈粥樣硬化模型——高脂高膽固醇飼料
造模周期:8-12周
成模判定:① 血清生化指標:檢測血清中總膽固醇(TC)、總三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量。
② 主動脈弓油紅O染色:分離主動脈弓縱向剪開主動脈,油紅O染色后在顯微鏡下觀察血管斑塊情況。
高膽固醇血癥模型——高脂高膽固醇飼料
造模周期:8周
成模判定:與對照組相比,模型組TC、TG和LDL-C水平顯著升高(P<0.05),HDL-C水平顯著下降(P<0.05),視為高膽固醇血癥。
取血和測定的要求:① 取血時間應在動物空腹狀態(tài),且在上午進行。
② 集中短時間內取血:由于血脂的24小時節(jié)律,取血應短時間內對所有動物集中取樣,避免因先后取血造成的血脂差異。
③ 血樣測定時間:取血樣后應對新鮮血樣標本即時或當天測定。