所謂微生物監(jiān)測是指用微生物學的方法對不同等級的實驗動物進行定期的抽樣檢查,以確定該等級動物是否感染了某些病原體。
因此,微生物學監(jiān)測是一個群體的、流行病學上的概念,它是通過從一個群體中定期抽取少量樣本進行檢測,從而判斷整個群體中某一疾病流行情況的一種方法。
那具體是怎樣檢測的呢?
在動物實驗過程中進行微生物監(jiān)測一般采用設置“哨兵動物”的方法。
所謂的“哨兵動物”是指為微生物監(jiān)測所設置的指示動物。哨兵動物一般采用免疫功能正常的清潔級或SPF級動物。
哨兵動物用于監(jiān)測動物實驗飼養(yǎng)室內,以及免疫缺陷動物的生產和動物實驗中某些病原微生物的感染情況。
那么什么樣的動物才能設置為哨兵動物呢?
目前針對哨兵動物并沒有統一實行的國際或國內標準,主要是根據實驗的需要需求來設置和使用。
因此對哨兵動物的選擇上會有所不同,但主要方向上應該遵循以下要素:
1、必須無菌或不攜帶有待監(jiān)測的特定病原以及抗體;
2、如果哨兵動物和被監(jiān)測動物來自不同的繁殖群,則需要選擇已知微生物狀態(tài)的動物作為哨兵動物;
3、盡可能與被監(jiān)測動物群的品系相同,但根據監(jiān)測目的的不同,可選擇不同品系的哨兵動物;
4、免疫反應正常的適齡動物。適齡動物必須能反應出被監(jiān)測動物的健康狀況,一般選用4-8周齡的鼠。
此外哨兵動物進場前必須隔離觀察和監(jiān)測,這些都有助于減少經哨兵動物傳入的病原,這對免疫缺陷動物尤其重要。
為減少動物間的打斗,尤其是雄性動物為爭奪資源的打斗行為,接觸式哨兵動物一般選用雌性動物比較容易與被監(jiān)測動物群相容。
監(jiān)測過程中哨兵動物與被監(jiān)測動物之間的接觸方式主要分為間接接觸和直接接觸。
間接接觸常用于監(jiān)測經排泄物傳播的疾病,被監(jiān)測動物數量較多,也用于監(jiān)測設備或運輸材料是否帶有病原。
間接接觸法中最常用的是舊墊料法,即每次換墊料時,將被監(jiān)測籠盒內取出約2盎司(約50g)墊料,放入哨兵動物籠盒內,或使用100%舊墊料。
為了保證有足量的墊料滿足動物筑巢行為,也可加入一些新的墊料,但至少要保證50%的墊料 是舊墊料。
直接接觸,即將哨兵動物直接放入被監(jiān)測動物群中,可監(jiān)測小范圍內的經氣溶膠或排泄物,分泌物傳播的疾病。
該方法可以有效的檢出一些經氣溶膠和排泄、分泌物傳播的病原。
為監(jiān)測動物群中病原微生物,必須對哨兵動物定期進行檢測。
哨兵鼠監(jiān)測范圍適用于以下幾種場景:動物入場前監(jiān)測、動物入場后監(jiān)測以及動物運輸和設施監(jiān)測。
在用哨兵動物對環(huán)境設施進行監(jiān)測時,根據檢測目的的不同來設置哨兵動物,若被監(jiān)測設施有氣流和氣壓的設置,要求在氣流進氣口處和排氣口處都放置哨兵動物進行檢測。
對于哨兵動物的檢測,至少每季度檢測一次,另外也需要根據當地的環(huán)境和研究需要增加檢測的頻率。
通常檢測方法有以下幾種:
1、細菌學檢測:取樣—細菌分離—可以菌落生化鑒定—血清學反應
2、病毒學檢測:血清學檢測病毒抗體—分離病毒
3、寄生蟲檢測:
體外寄生蟲:透明膠紙黏取法、拔毛鏡檢法等;
體內寄生蟲:分泌物涂片法、組織剖面壓印法等。
此外,發(fā)病和死亡的動物必須剖檢,這是在常規(guī)檢測之外必須要做的,剖檢結果將指導是否要增加檢測頻率或者增加被檢動物的數量。
當然哨兵鼠只是眾多實驗動物檢測方法的一種,如果整個系統中飼養(yǎng)的動物都是同一品系、相同健康標準(如生產繁殖群)、且生產成本并不高的動物群時,可采用隨機抽檢的方法。
向默默付出的哨兵鼠和默默付出的實驗動物從業(yè)者致敬!!
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