『視頻』如何構(gòu)建DIO（飲食誘導(dǎo)的肥胖）模型

關(guān)于60%脂肪供能高脂飼料

介紹及應(yīng)用方向

小鼠周齡：3-4周離乳即可（若有特殊實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，可根?jù)實(shí)際情況選取不同周齡的小鼠）。

儲(chǔ)存方式：4℃冷藏（需要使用的）或-20℃冷凍（暫時(shí)不用的）。

保質(zhì)期：3個(gè)月

建議采購(gòu)量：按照5克/只/天計(jì)算采購(gòu)量 。

常見(jiàn)相關(guān)模型的建模及成模判定

肥胖造模

采食方式：不做限制，自由采食。

造模周期：6-8周

成模判定：實(shí)驗(yàn)組體重超過(guò)對(duì)照組20%（簡(jiǎn)單判定）。

胰島素抵抗模型

采食方式：不做限制，自由采食。

造模周期：?6-8周

成模判定：

1、空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）測(cè)定：動(dòng)物禁食5-6h，取血測(cè)FBG和FINS，計(jì)算胰島素敏感指數(shù)（ISI），評(píng)估胰島素抵抗的程度。【ISI=ln(FBG*FINS)-1】。

2、口服糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT）：用50%葡萄糖（2g/Kg）空腹灌胃，割尾取血，檢測(cè)灌胃0,30,60,90,120分鐘血糖。

3、多組間比較采用單因素方差分析，P<0.05即有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明動(dòng)物建模成功。

二型糖尿病造模

采食方式：不做限制，自由采食

造模周期：?6-8周

額外干預(yù)：STZ（鏈脲佐菌素）注射30mg/kg 二到四次（推薦）或者110mg/kg一次（不推薦，易造成小鼠死亡或成為一型糖尿病）。

成模判定：在胰島素抵抗基礎(chǔ)上，以2次。FBG≥11.1mol/L和隨即血≥16.7mol/L為糖尿病成模標(biāo)準(zhǔn)。

脂肪肝造模

采食方式：不做限制，自由采食。

造模周期：?8周左右

成模判定：

1、肝組織HE染色：用10%的中性甲醛溶液固定肝臟組織，脫水、包埋后，進(jìn)行常規(guī)HE染色，光鏡下觀(guān)察大小鼠肝臟脂肪變性情況。

2、血清生化指標(biāo)：檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽固醇（TC）、總?cè)８视停═G）的含量。

3、生理學(xué)指標(biāo)：肝指數(shù)=肝臟濕重（g）/體重（g）*100%。

高脂飼料飼喂注意事項(xiàng)

鑒于高脂飼料在適口性方面稍低于常規(guī)飼料，不做換食操作容易造成小鼠厭食、采食量低等情況，所以在開(kāi)始飼喂高脂飼料時(shí)，需要進(jìn)行換食操作步驟，目前有兩個(gè)換食方法：

1、七天換食法：以逐步遞增的方式增加高脂飼料在日常飼喂中的占比，直至全部替換，此方法比較溫和。

2、 斷食法：給實(shí)驗(yàn)組小鼠直接斷食24小時(shí)后，開(kāi)始投喂高脂飼料，此法比較激烈，對(duì)一些特殊品系小鼠并不適用，但是節(jié)約時(shí)間、方便（推薦）。

高脂飼料因?yàn)楣┠鼙瘸Ｒ?guī)飼料大，所以在飼喂高脂飼料時(shí)，發(fā)現(xiàn)小鼠在采食量上有所下降為正常現(xiàn)象，一般，如果常規(guī)飼料采食量在5g/d，高脂飼料在3g/d以上即可，越多越好，監(jiān)控每天采食量，盡量做到每天或者兩天投放，換食時(shí)，鼠籠中剩余的高脂飼料可作廢處理。

每周稱(chēng)重進(jìn)行對(duì)比，一般兩周內(nèi)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組開(kāi)始拉開(kāi)體重，如果3-4周時(shí)體重還沒(méi)有明顯差距，即需要檢針對(duì)性的檢查，考慮是否飼料有問(wèn)題或者沒(méi)有進(jìn)行換食操作等，如果是個(gè)別現(xiàn)象，可考慮為肥胖抵抗，將產(chǎn)生肥胖抵抗的小鼠剔除實(shí)驗(yàn)組，不做數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。

高脂飼料相對(duì)于常規(guī)飼料偏軟一些，在條件允許的情況下，可以投放一些磨牙棒，便于小鼠磨牙使用。

純化型編號(hào)：XT10190019-1

? ? ? ? ? ? ? ?（對(duì)標(biāo)D12492）

對(duì)照組編號(hào)：XT10190020

? ? ? ? ? ? ? ?（對(duì)標(biāo)D12450J）

配方表：

對(duì)照組編號(hào)：1010009（Co60輻照實(shí)驗(yàn)鼠維持飼料）

（說(shuō)明：因?yàn)槿占Z的配方涉及到公司機(jī)密，無(wú)法公開(kāi)，此處提供兩組的常規(guī)七項(xiàng)參考值做對(duì)照）

供能比：

區(qū)別說(shuō)明