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    基因敲除小鼠在動(dòng)脈粥樣硬化模型中的應(yīng)用研究

    動(dòng)脈粥樣硬化研究中,常用的模式動(dòng)物是野生型C57BL/6小鼠,但其病變僅發(fā)生在主動(dòng)脈根以及主動(dòng)脈瓣尖端。1994年Nakashima Y.等第一次報(bào)道了用ApoE基因敲除小鼠結(jié)合西方飲食飼料來(lái)誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化,并研究了在不同階段的病理特點(diǎn)。

    研究方案:4周齡野生型及基因敲除C57BL/6小鼠,用常規(guī)飼料適應(yīng)1周后,對(duì)照組繼續(xù)喂食常規(guī)飼料,模型組用西方飲食飼料喂養(yǎng)(Western -type diet,高脂高糖高膽固醇);在第6, 8, 10, 15, 20, 30, 40分別取樣分析。

    研究結(jié)果:

    1、血漿膽固醇水平顯著升高

    WT ApoE KO
    常規(guī)飼料 101~119mg/dL (109mg/dL) 360-885 mg/dL (606 mg/dL)
    西方飲食飼料 154~301mg/dL 1085~4402 mg/dL

     

    2、動(dòng)脈損傷的發(fā)展進(jìn)程

    西方飲食飼料會(huì)加快基因敲除小鼠動(dòng)脈損傷的進(jìn)程,相較于對(duì)照組,西方飲食組相應(yīng)的病變會(huì)提前3-5周的時(shí)間。

    西方飲食飼料喂養(yǎng)的基因敲除小鼠在病變發(fā)展過(guò)程中表征更明顯、病變區(qū)域更大、基體受破壞程度更深。并發(fā)癥如鈣化僅在西方飲食飼料喂養(yǎng)的基因敲除小鼠中發(fā)現(xiàn)。

    對(duì)比其他小鼠模型,基因敲除小鼠不僅在動(dòng)脈瓣底部,還在胸及腹部動(dòng)脈、主動(dòng)脈叉、頸動(dòng)脈、肺動(dòng)脈表現(xiàn)出更大范圍的動(dòng)脈粥樣硬化病變。常規(guī)飼料喂養(yǎng)的基因敲除小鼠也會(huì)出現(xiàn)病變,但造模時(shí)間更長(zhǎng)。

    西方飲食飼料與動(dòng)脈粥樣硬化

    基因敲除小鼠用Western Diet喂養(yǎng)在其膽固醇水平發(fā)生急劇升高,尤其在極低密度脂肪蛋白分層以及中間密度脂肪蛋白分層,低密度脂肪蛋白也有大量增加。小鼠表現(xiàn)出明顯的動(dòng)脈粥樣硬化病變。不過(guò)Western Diet喂養(yǎng)或常規(guī)飼料喂養(yǎng)的基因敲除小鼠在病變位置上沒(méi)有區(qū)別,而病變程度上Western Diet喂養(yǎng)的小鼠更嚴(yán)重,發(fā)生的更早,脂肪量更多。

    高糖高脂高膽固醇的Western Diet作為動(dòng)脈粥樣硬化加重加速的一種方法,與人類的病理進(jìn)程更接近;并可從純化飼料成分中分析哪種獨(dú)特成分對(duì)疾病發(fā)展有影響,為藥物介入提供可能性。

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