小鼠高脂飼料 – 協(xié)同生物 http://www.ychljhotel.com/en 26年專注實驗動物飼料研發(fā)及生產 Fri, 02 Jul 2021 00:56:34 +0000 en-US hourly 1 https://wordpress.org/?v=5.7.12 http://www.ychljhotel.com/en/wp-content/uploads/2021/06/cropped-Logo-2-32x32.png 小鼠高脂飼料 – 協(xié)同生物 http://www.ychljhotel.com/en 32 32 高脂飼料誘導的2型糖尿病小鼠肌腱修復能力受損 http://www.ychljhotel.com/en/%e9%ab%98%e8%84%82%e9%a5%b2%e6%96%99%e8%af%b1%e5%af%bc%e7%9a%842%e5%9e%8b%e7%b3%96%e5%b0%bf%e7%97%85%e5%b0%8f%e9%bc%a0%e8%82%8c%e8%85%b1%e4%bf%ae%e5%a4%8d%e8%83%bd%e5%8a%9b%e5%8f%97%e6%8d%9f/ http://www.ychljhotel.com/en/%e9%ab%98%e8%84%82%e9%a5%b2%e6%96%99%e8%af%b1%e5%af%bc%e7%9a%842%e5%9e%8b%e7%b3%96%e5%b0%bf%e7%97%85%e5%b0%8f%e9%bc%a0%e8%82%8c%e8%85%b1%e4%bf%ae%e5%a4%8d%e8%83%bd%e5%8a%9b%e5%8f%97%e6%8d%9f/#respond Thu, 01 Jul 2021 02:36:21 +0000 http://www.ychljhotel.com/?p=5667

肥胖的流行導致了2型糖尿病（T2D）的大量增加，雖然T2D的一些繼發(fā)性并發(fā)癥已被廣泛認知，其細胞和分子機制也已明確，但T2D對肌肉骨骼系統(tǒng)的影響尚不清楚。臨床證據(jù)表明，肌腱強度和修復能力受到損害。在本實驗中，肥胖和T2D小鼠模型再現(xiàn)了這種情況對肌腱修復的有害影響。

實驗方法

5周齡的雄性C57BL/6J小鼠分為兩組，分別飼喂高脂肪飼料（60%kcal）和對照飼料（10%kcal）12周，然后用斜角針刺傷指長屈肌肌腱，傷后第0、7、14和28天，通過生物力學和組織學分析評估FDL肌腱愈合的進展。

實驗結果與評估

高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠體重增加，空腹血糖水平升高，兩者都與T2D一致。12周后，高脂飼料組與對照組小鼠未損傷的FDL肌腱的生物力學性能沒有差異，但24周時，高脂飼料組小鼠未損傷肌腱的最大力下降。在穿刺損傷后，高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠肌腱在損傷后第28天顯示出受損的生物力學特性，損傷部位的組織學檢查顯示高脂飼料組小鼠的修復面積較小，修復區(qū)域的細胞含量較低。胰島素受體在損傷部位的大多數(shù)細胞中表達，與飲食無關。

高脂飼料誘導的肥胖和T2D模型小鼠再現(xiàn)了在該患者群體中觀察到的受損肌腱愈合。確切的機制尚不清楚，但我們認為細胞缺陷可能與胰島素抵抗有關，導致?lián)p傷部位的細胞增殖減少，最終影響了受損肌腱的愈合。

原文檢索：Tendon Repair Is Compromised in a High Fat Diet-Induced Mouse Model of Obesity and Type 2 Diabetes, PLOS ONE

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高脂飼料的儲存與更換

60%高脂飼料是適用于誘導小鼠肥胖模型的飲食，由于脂肪含量較高，飼料至少應儲存在4°以下的環(huán)境中，籠盒網(wǎng)格中的飼料最好每1-2天更換一次防止變質。此外，可以將網(wǎng)格中剩余的飼料放到底盒上確保小鼠隨時都能采食。

充足飲水

保障充足的水源對于小鼠的增長體重是至關重要的。如果你的設施是自動飲水的，動物到達設施的第一周內給它們提供水瓶度過適應期。

適應期的體重變化

在運輸?shù)倪^程中，小鼠的體重會降低，但是到達目的地后的一周或兩周會增長回來。

減少應激反應

運輸中將小鼠放在不同的包裝箱中會減少打斗，減少應激會幫助小鼠增加或維持合適的體重。使用小鼠時動作要輕柔、舒緩。

墊料的選擇

不推薦使用玉米芯墊料，因為小鼠偶爾會吃玉米芯卻得不到任何的熱量。這導致小鼠不能吃足夠多的高脂飼料，影響體重增長。楊木刨花墊料是更合適的選擇。

血糖水平檢測

檢測血糖的最佳時間是在早晨，因為小鼠在夜間覓食，早晨的血糖含量是比較高的。當然，無論在什么時候檢測血糖含量，整個實驗過程中每天應保持同一時間來檢測血糖，這樣可以得到相對一致的數(shù)據(jù)。

替補小鼠

增加10%的替補小鼠用于實驗，因為有些小鼠可能在適應階段不能很好的保持體重。如果有小鼠體重持續(xù)下降，可以使用替補小鼠繼續(xù)實驗。

6周開始飼喂高脂飼料的B6J小鼠體重變化

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在自發(fā)炎癥性疾病中，炎癥的短期發(fā)熱、腫脹是身體對損傷或感染的保護反應，但長期的炎癥會嚴重損害身體。

研究表明，通過高脂或高膽固醇飲食可以影響某些自身免疫性疾病。圣裘德兒童研究醫(yī)院的Kanneganti博士領導的一個團隊研究了突變小鼠，這些小鼠出現(xiàn)了類似于人類慢性復發(fā)性多灶性骨髓炎的情況。這種罕見的炎性骨病以疼痛和關節(jié)腫脹為特征，可導致生長緩慢和永久性骨畸形。

正如預期的那樣，在第100天，喂食常規(guī)飼料的突變小鼠出現(xiàn)了后爪炎癥、骨侵蝕和淋巴結腫大。然而，以富含飽和脂肪和膽固醇飼料喂養(yǎng)的突變小鼠在很大程度上受到保護。

眾所周知，高脂肪和高膽固醇飲食會引起腸道微生物群落的變化。研究小組的分析表明，正常飲食的突變小鼠的腸道微生物群與健康的野生型小鼠明顯不同，例如突變小鼠體內普氏菌的增多就與炎癥有關，這些變化在喂食高脂飼料的突變小鼠中顯著減少。

為進一步探討腸道微生物群在自發(fā)炎癥性疾病中的作用，研究小組將正常喂養(yǎng)的突變小鼠的微生物群移植到幼鼠體內，可提高普氏菌水平，加速骨髓炎。相反，將高脂飼料喂養(yǎng)的突變小鼠的微生物群移植到幼鼠體內，限制了普雷沃菌，保護了小鼠免受骨髓炎。

為更好地理解其中機制，研究人員分析了動物腳掌中白細胞介素-1β（IL-1β）的水平，白細胞介素-1β以前與炎癥性骨病有關。正常喂養(yǎng)的突變小鼠IL-1β蛋白濃度顯著升高，而高脂飼料喂養(yǎng)的突變小鼠IL-1β蛋白水平與健康對照組相當。這表明高脂飲食通過影響IL-1β的水平來抑制易感小鼠的骨髓炎。

總之，這些發(fā)現(xiàn)表明高脂飲食通過改變腸道微生物群影響易感小鼠的骨髓炎，進而影響遠處中性粒細胞的IL-1β水平，但微生物群究竟是如何影響IL-1β水平的還有待確定。

原文檢索：Diet Affects Autoinflammatory Disease Via Gut Microbes, National Institutes of Health

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炎癥性腸病(IBD)以腸慢性炎癥為特征，主要包括潰瘍性結腸炎和克羅恩病。在西方國家，估計有1/1000的人患有IBD。雖然IBD與遺傳易感性有關，但也發(fā)現(xiàn)這種疾病受到環(huán)境因素的影響。流行病學研究已經將西方的高脂肪飲食與IBD聯(lián)系起來，此外，過去的幾十年內，全世界的發(fā)病率都在增加，這可能部分歸因于發(fā)展中國家飲食習慣的改變。

臨床證據(jù)表明，高脂肪飲食和肥胖可能會增加IBD的風險。在臨床中，體重指數(shù)(BMI)高的患者表現(xiàn)出更嚴重的癥狀，患者住院需求增加。因此，探索脂肪庫與炎癥性腸病之間的分子聯(lián)系具有重要的意義。事實上，脂肪組織最近被認為是一種內分泌器官，通過主動分泌脂肪因子。這些脂肪因子具有促炎或抗炎作用，可能與肥胖相關疾病的發(fā)病過程有關。

在脂肪基中，外泌體是近年來研究的熱點。外泌體最近被確認為細胞間通訊的重要介質，通過傳遞封裝的貨物，如生物活性脂類、非編碼RNA、mRNA和蛋白質。由于外泌體的表面蛋白結構，它對受體細胞也表現(xiàn)出較高的靶特異性。所有這些都使外泌體成為細胞內通訊，特別是器官間相互交流的重要中介。此外，外泌體還被認為是一種合理的藥物傳遞載體，有望用于疾病管理。

2020年4月，第四軍醫(yī)大學楊國棟、張健等研究者通過揭示內臟脂肪來源的外泌體(VAT-Exos)的作用來探究高脂肪飲食是如何影響結腸炎的。而且，該機制被解碼并用于潛在的結腸炎預防和治療。

由于肥胖和高脂飲食對結腸炎的嚴重程度具有潛在的致病作用。因此，喂食高脂飼料(HFD) 4個月的雄性C57BL/6小鼠也會發(fā)生DSS誘導的結腸炎。與預期一致，高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠體重明顯增加，糖耐量和胰島素敏感性明顯下降，結果表明高脂飼料確實加重了DSS小鼠結腸炎的嚴重程度。

高脂飼料可加重DSS小鼠結腸炎的嚴重程度

為評估高脂飼料是否通過肥胖加重了結腸炎的嚴重程度，作者主要關注VAT-Exos，因為內臟脂肪被廣泛認為是有害脂肪，而脂肪組織被認為是血液中循環(huán)外泌體的主要來源之一。為了探索VAT-Exos是否能夠循環(huán)進入結腸，外泌體被標記為DiR。結果發(fā)現(xiàn)，VAT-Exos在腸固有層積累，進一步研究發(fā)現(xiàn)高脂飼料喂食的小鼠VAT-Exos可加重結腸炎。

最后在機制方面，發(fā)現(xiàn)外泌體至少部分地通過轉移促炎miRNAs(如miR-155)來促進M1的分化。此外，外泌體介導的miR-155抑制劑的遞送可顯著預防DSS誘導的結腸炎。總之，該研究揭示了肥胖如何加重結腸炎的外泌體途徑，并提出了一種基于外泌體的結腸炎干預策略。

研究示意圖

在高脂飼料誘導下，VAT-Exos轉化為促炎性表型且有效地循環(huán)進入結腸固有層，外泌體通過包裹的miR-155和可能的其他促炎miRNAs促進巨噬細胞M1極化。而負載miR-155抑制劑的VAT-Exos可通過誘導受體巨噬細胞的M2極化來緩解結腸炎。

文章來源：臨床與基礎研究

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