無(wú)菌動(dòng)物主要通過(guò)無(wú)菌剖宮產(chǎn)手術(shù)或無(wú)菌胚胎移植進(jìn)行無(wú)菌化而獲得,并且利用無(wú)菌飼養(yǎng)方法維持于無(wú)菌隔離器中。由于無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)外不攜帶任何生物體,由此可排除生物對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,從而明顯提高實(shí)驗(yàn)的敏感性、重復(fù)性,并有利于探究生命活動(dòng)基本規(guī)律。
至于能否飼養(yǎng)出質(zhì)量合格的無(wú)菌小鼠,關(guān)鍵是有無(wú)適合無(wú)菌小鼠生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)配方飼料。鑒于無(wú)菌小鼠的生長(zhǎng)環(huán)境為無(wú)菌環(huán)境,無(wú)菌小鼠飼料也必須經(jīng)過(guò)無(wú)菌化處理。目前應(yīng)用于飼料行業(yè)的主流滅菌方法為高壓滅菌和輻照滅菌,但兩者對(duì)飼料的營(yíng)養(yǎng)成分均有一定的影響。
研究表明,飼料經(jīng)121℃,60分鐘高壓蒸汽滅菌后可達(dá)無(wú)菌要求,精氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、酪氨酸損失在25%以下,維生素A、B1、B2、B6損失較多,一般成分和無(wú)機(jī)鹽無(wú)明顯變化,室溫下隔離器內(nèi)最多保存10天;飼料經(jīng)50kGy60CO-γ射線輻照滅菌后可達(dá)無(wú)菌要求,粗蛋白、蛋氨酸明顯減少,維生素A、E、B1、B6略微減少,其它營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)明顯變化,且無(wú)菌小鼠飼料輻照滅菌的最低有效劑量為25kGy,最高耐受劑量為50kGy.
無(wú)菌小鼠飼料除了保證無(wú)菌外也應(yīng)關(guān)注無(wú)菌小鼠的營(yíng)養(yǎng)需求,但目前國(guó)內(nèi)外尚沒(méi)有關(guān)于無(wú)菌小鼠飼料營(yíng)養(yǎng)的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。早期有研究指出無(wú)菌小鼠的采食量比普通小鼠采食量大,但其糞中排泄的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也較普通小鼠多。后續(xù)也有研究表明,無(wú)菌動(dòng)物的能量需求同普通動(dòng)物一致,但是其代謝率比普通動(dòng)物低20%-30%.
由于無(wú)菌小鼠的腸道內(nèi)沒(méi)有微生物,其自身無(wú)法合成B族維生素及維生素K,所以無(wú)菌小鼠飼料中應(yīng)尤其關(guān)注維生素的添加水平。有研究者利用輻照后的AIN93G飼料飼喂無(wú)菌KM小鼠導(dǎo)致小鼠體型瘦弱,出現(xiàn)明顯的脊柱凸起,毛發(fā)粘染臟亂;而在AIN93G飼料基礎(chǔ)上提高維生素水平,經(jīng)高劑量輻照后(50kGy)飼喂無(wú)菌KM小鼠,其生長(zhǎng)繁殖情況均正常,表明額外添加維生素能夠滿足繁殖階段無(wú)菌小鼠的身體需求。
至今,關(guān)于無(wú)菌動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需求研究并不多,多數(shù)研究距今比較久遠(yuǎn)且結(jié)論不一,基于無(wú)菌動(dòng)物培育及營(yíng)養(yǎng)需求研究現(xiàn)狀,我們需要進(jìn)行更多的研究來(lái)確定一個(gè)無(wú)菌動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。
]]>不同滅菌方式主要區(qū)別在于維生素含量的設(shè)置,高劑量輻照和高壓滅菌維生素的損失率是不一樣的,所以選擇的滅菌方式不一樣就決定無(wú)菌鼠糧維生素添加方案不同。
]]>