Product Code：XTHF45
Intended species: rat?(SD, Wistar, etc.)
Intended?Age: 3 to 4 weeks weaning of age period (if there is a special experimental purpose, according to the actual situation of the selection of different age of the experimental mice)
Product storage method: 4 ℃ cold storage?(short-term use) or -20 ℃ freezing?(long-term standby)
Product shelf life: 3?months
Order feed dosage: rats: 25 g?/?animal?/?day
]]>高脂飼料的儲存與更換
60%高脂飼料是適用于誘導(dǎo)小鼠肥胖模型的飲食，由于脂肪含量較高，飼料至少應(yīng)儲存在4°以下的環(huán)境中，籠盒網(wǎng)格中的飼料最好每1-2天更換一次防止變質(zhì)。此外，可以將網(wǎng)格中剩余的飼料放到底盒上確保小鼠隨時都能采食。
充足飲水
保障充足的水源對于小鼠的增長體重是至關(guān)重要的。如果你的設(shè)施是自動飲水的，動物到達(dá)設(shè)施的第一周內(nèi)給它們提供水瓶度過適應(yīng)期。
適應(yīng)期的體重變化
在運(yùn)輸?shù)倪^程中，小鼠的體重會降低，但是到達(dá)目的地后的一周或兩周會增長回來。
減少應(yīng)激反應(yīng)
運(yùn)輸中將小鼠放在不同的包裝箱中會減少打斗，減少應(yīng)激會幫助小鼠增加或維持合適的體重。使用小鼠時動作要輕柔、舒緩。
墊料的選擇
不推薦使用玉米芯墊料，因為小鼠偶爾會吃玉米芯卻得不到任何的熱量。這導(dǎo)致小鼠不能吃足夠多的高脂飼料，影響體重增長。楊木刨花墊料是更合適的選擇。
血糖水平檢測
檢測血糖的最佳時間是在早晨，因為小鼠在夜間覓食，早晨的血糖含量是比較高的。當(dāng)然，無論在什么時候檢測血糖含量，整個實驗過程中每天應(yīng)保持同一時間來檢測血糖，這樣可以得到相對一致的數(shù)據(jù)。
替補(bǔ)小鼠
增加10%的替補(bǔ)小鼠用于實驗，因為有些小鼠可能在適應(yīng)階段不能很好的保持體重。如果有小鼠體重持續(xù)下降，可以使用替補(bǔ)小鼠繼續(xù)實驗。
據(jù).png)
6周開始飼喂高脂飼料的B6J小鼠體重變化
]]>在自發(fā)炎癥性疾病中，炎癥的短期發(fā)熱、腫脹是身體對損傷或感染的保護(hù)反應(yīng)，但長期的炎癥會嚴(yán)重?fù)p害身體。
研究表明，通過高脂或高膽固醇飲食可以影響某些自身免疫性疾病。圣裘德兒童研究醫(yī)院的Kanneganti博士領(lǐng)導(dǎo)的一個團(tuán)隊研究了突變小鼠，這些小鼠出現(xiàn)了類似于人類慢性復(fù)發(fā)性多灶性骨髓炎的情況。這種罕見的炎性骨病以疼痛和關(guān)節(jié)腫脹為特征，可導(dǎo)致生長緩慢和永久性骨畸形。
正如預(yù)期的那樣，在第100天，喂食常規(guī)飼料的突變小鼠出現(xiàn)了后爪炎癥、骨侵蝕和淋巴結(jié)腫大。然而，以富含飽和脂肪和膽固醇飼料喂養(yǎng)的突變小鼠在很大程度上受到保護(hù)。
眾所周知，高脂肪和高膽固醇飲食會引起腸道微生物群落的變化。研究小組的分析表明，正常飲食的突變小鼠的腸道微生物群與健康的野生型小鼠明顯不同，例如突變小鼠體內(nèi)普氏菌的增多就與炎癥有關(guān)，這些變化在喂食高脂飼料的突變小鼠中顯著減少。
為進(jìn)一步探討腸道微生物群在自發(fā)炎癥性疾病中的作用，研究小組將正常喂養(yǎng)的突變小鼠的微生物群移植到幼鼠體內(nèi)，可提高普氏菌水平，加速骨髓炎。相反，將高脂飼料喂養(yǎng)的突變小鼠的微生物群移植到幼鼠體內(nèi)，限制了普雷沃菌，保護(hù)了小鼠免受骨髓炎。
為更好地理解其中機(jī)制，研究人員分析了動物腳掌中白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）的水平，白細(xì)胞介素-1β以前與炎癥性骨病有關(guān)。正常喂養(yǎng)的突變小鼠IL-1β蛋白濃度顯著升高，而高脂飼料喂養(yǎng)的突變小鼠IL-1β蛋白水平與健康對照組相當(dāng)。這表明高脂飲食通過影響IL-1β的水平來抑制易感小鼠的骨髓炎。
總之，這些發(fā)現(xiàn)表明高脂飲食通過改變腸道微生物群影響易感小鼠的骨髓炎，進(jìn)而影響遠(yuǎn)處中性粒細(xì)胞的IL-1β水平，但微生物群究竟是如何影響IL-1β水平的還有待確定。
原文檢索：Diet Affects Autoinflammatory Disease Via Gut Microbes, National Institutes of Health
炎癥性腸病(IBD)以腸慢性炎癥為特征，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。在西方國家，估計有1/1000的人患有IBD。雖然IBD與遺傳易感性有關(guān)，但也發(fā)現(xiàn)這種疾病受到環(huán)境因素的影響。流行病學(xué)研究已經(jīng)將西方的高脂肪飲食與IBD聯(lián)系起來，此外，過去的幾十年內(nèi)，全世界的發(fā)病率都在增加，這可能部分歸因于發(fā)展中國家飲食習(xí)慣的改變。
臨床證據(jù)表明，高脂肪飲食和肥胖可能會增加IBD的風(fēng)險。在臨床中，體重指數(shù)(BMI)高的患者表現(xiàn)出更嚴(yán)重的癥狀，患者住院需求增加。因此，探索脂肪庫與炎癥性腸病之間的分子聯(lián)系具有重要的意義。事實上，脂肪組織最近被認(rèn)為是一種內(nèi)分泌器官，通過主動分泌脂肪因子。這些脂肪因子具有促炎或抗炎作用，可能與肥胖相關(guān)疾病的發(fā)病過程有關(guān)。
在脂肪基中，外泌體是近年來研究的熱點(diǎn)。外泌體最近被確認(rèn)為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)，通過傳遞封裝的貨物，如生物活性脂類、非編碼RNA、mRNA和蛋白質(zhì)。由于外泌體的表面蛋白結(jié)構(gòu)，它對受體細(xì)胞也表現(xiàn)出較高的靶特異性。所有這些都使外泌體成為細(xì)胞內(nèi)通訊，特別是器官間相互交流的重要中介。此外，外泌體還被認(rèn)為是一種合理的藥物傳遞載體，有望用于疾病管理。
2020年4月，第四軍醫(yī)大學(xué)楊國棟、張健等研究者通過揭示內(nèi)臟脂肪來源的外泌體(VAT-Exos)的作用來探究高脂肪飲食是如何影響結(jié)腸炎的。而且，該機(jī)制被解碼并用于潛在的結(jié)腸炎預(yù)防和治療。
由于肥胖和高脂飲食對結(jié)腸炎的嚴(yán)重程度具有潛在的致病作用。因此，喂食高脂飼料(HFD) 4個月的雄性C57BL/6小鼠也會發(fā)生DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎。與預(yù)期一致，高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠體重明顯增加，糖耐量和胰島素敏感性明顯下降，結(jié)果表明高脂飼料確實加重了DSS小鼠結(jié)腸炎的嚴(yán)重程度。
高脂飼料可加重DSS小鼠結(jié)腸炎的嚴(yán)重程度
為評估高脂飼料是否通過肥胖加重了結(jié)腸炎的嚴(yán)重程度，作者主要關(guān)注VAT-Exos，因為內(nèi)臟脂肪被廣泛認(rèn)為是有害脂肪，而脂肪組織被認(rèn)為是血液中循環(huán)外泌體的主要來源之一。為了探索VAT-Exos是否能夠循環(huán)進(jìn)入結(jié)腸，外泌體被標(biāo)記為DiR。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，VAT-Exos在腸固有層積累，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)高脂飼料喂食的小鼠VAT-Exos可加重結(jié)腸炎。
最后在機(jī)制方面，發(fā)現(xiàn)外泌體至少部分地通過轉(zhuǎn)移促炎miRNAs(如miR-155)來促進(jìn)M1的分化。此外，外泌體介導(dǎo)的miR-155抑制劑的遞送可顯著預(yù)防DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎?？傊撗芯拷沂玖朔逝秩绾渭又亟Y(jié)腸炎的外泌體途徑，并提出了一種基于外泌體的結(jié)腸炎干預(yù)策略。
研究示意圖
在高脂飼料誘導(dǎo)下，VAT-Exos轉(zhuǎn)化為促炎性表型且有效地循環(huán)進(jìn)入結(jié)腸固有層，外泌體通過包裹的miR-155和可能的其他促炎miRNAs促進(jìn)巨噬細(xì)胞M1極化。而負(fù)載miR-155抑制劑的VAT-Exos可通過誘導(dǎo)受體巨噬細(xì)胞的M2極化來緩解結(jié)腸炎。
文章來源：臨床與基礎(chǔ)研究
]]>一、ApoE-/-小鼠
盡管ApoE-/-小鼠已是目前研究AS最常用的轉(zhuǎn)基因動物模型，但是如果大量用于實驗，光動物購置費(fèi)就需要數(shù)萬元。
單純的ApoE-/-小鼠在3月齡時就會出現(xiàn)動脈脂肪堆積，如果配合高脂飼料，會很快出現(xiàn)典型的早期AS病變，非常利于研究者對AS病變的發(fā)生、發(fā)展過程和形成機(jī)制進(jìn)行研究。
但是，飼料中膽固醇的比例不同會造成ApoE-/-小鼠病變部位的變異性。AS病變部位可能在主動脈弓、胸主動脈、腹主動脈之間發(fā)生變化，病變程度上也會有差異。ApoE-/-小鼠采用高脂飼料喂食后，AS病變通常較重，主要體現(xiàn)在血管內(nèi)膜膽固醇沉積，斑塊較重，但是很少見到斑塊破裂后血栓形成。
如果AS病變太重，對于藥物研究來說是不太有利的，可能會造成假陰性?？傮w來說，我們認(rèn)為高脂飼料喂食ApoE-/-小鼠誘導(dǎo)AS更適合用于研究疾病機(jī)制。
二、SD大鼠
大鼠對高脂飲食并不敏感，單純高脂飲食誘導(dǎo)是很難造模成功的。盡管有文獻(xiàn)表明在飼料中加入膽酸鈉和抗甲狀腺藥物，可以促進(jìn)膽固醇吸收，但效果仍然有限。
大鼠可能最終會有明顯高脂血癥和血管內(nèi)膜膽固醇沉積，但是難以出現(xiàn)斑塊，與人類AS病變相去甚遠(yuǎn)。不過，這也解釋了一個現(xiàn)象，即大鼠高血脂與輕病變的矛盾。
三、新西蘭兔
兔子對膽固醇吸收率可達(dá)75%-90%，而且對血脂的清除能力很弱。因此，只要給予高脂飼料喂養(yǎng)，很快就會形成AS，非常有利于短期內(nèi)藥物篩選。
高脂飼料喂食的兔子AS病變特征是內(nèi)膜脂質(zhì)沉積、中膜彈力纖維破壞，很難達(dá)到粥樣斑塊的程度，這一點(diǎn)與人類AS存在差異。但是換個角度看，兔子AS模型似乎特別適用于研究AS早期的血管內(nèi)膜、中膜損傷機(jī)制。
此外，由于長期的高脂飲食，又難以代謝，兔子經(jīng)常會出現(xiàn)肝腎功能損害。高脂飼料喂食1個月時，兔子已逐漸抗拒進(jìn)食，體重減輕，甚至可能出現(xiàn)膽固醇中毒而死亡的狀況。
兔子還有一個特征，就是對實驗環(huán)境要求較高。高脂飲食加上生活環(huán)境不佳，兔子極易出現(xiàn)腹瀉，長期腹瀉會進(jìn)一步導(dǎo)致體液丟失、電解質(zhì)紊亂、酸堿平衡失調(diào)，也會導(dǎo)致動物死亡。
]]>高脂飼料的進(jìn)食問題
實驗動物在食用高脂飼料時容易產(chǎn)生“厭食”情緒，表現(xiàn)為動物進(jìn)食量減少甚至完全不進(jìn)食的現(xiàn)象。實際上，進(jìn)食量偏少是投喂高脂飼料過程中的正?，F(xiàn)象，高脂飼料相比普通飼料所蘊(yùn)含的能量更高，例如適用于小鼠肥胖模型的60%脂肪供能高脂飼料，大約3kg就相當(dāng)于5kg的普通飼料。所以實驗動物更容易感到飽腹，自然會停止進(jìn)食。
如果實驗動物完全不進(jìn)食，就需要利用換食法。一般我們使用比較溫和的七天換食法，即混合高脂飼料與普通飼料喂食，過程中逐步增加高脂飼料的比例，在第七天左右完全替換為高脂飼料；另一種換食法就是直接斷食24小時，實驗動物饑餓的情況下更容易接受新的飼料，這也是更省時的一種方法，不過對實驗動物的腸胃會造成一定傷害。
根據(jù)我們多年的經(jīng)驗判斷，最有可能導(dǎo)致實驗動物不進(jìn)食的原因即是飼料類型差異。高脂飼料又分為純化型和日糧型兩種，日糧型高脂飼料主要使用玉米、小麥等糧食作為原料，并在此基礎(chǔ)上添加脂肪等物質(zhì)，適口性較好；純化型高脂飼料則是原材料經(jīng)過高度提純處理過的飼料，因此適口性較差。
高脂飼料的硬度問題
第二個常見問題是高脂飼料的硬度問題。為達(dá)到高脂高供能的效果，我們通常在飼料中添加豬油，但豬油的凝固點(diǎn)較低，這就導(dǎo)致了常溫下飼料硬度不足。針對高脂飼料硬度不足的現(xiàn)象，可以通過冷藏飼料(4℃或者-20℃)或一到兩天更換一次飼料的方式來維持硬度，促進(jìn)實驗動物進(jìn)食。同時，我們也在不斷改進(jìn)生產(chǎn)工藝，提升產(chǎn)品硬度。
高脂飼料的體重增長問題
此外，也有客戶反饋實驗動物食用高脂飼料一段時間后，體形卻沒有明顯增長。這就涉及到多個方面的原因。
1. 實驗動物基因的差異
不同實驗動物對脂肪的耐受性不同，例如大鼠有抗肥胖的“基因天賦”，而小鼠對脂肪的吸收能力更強(qiáng)，所以研究者做高脂造模實驗時更傾向于選擇使用后者。
2. 實驗動物的采食量指標(biāo)
如果實驗動物的采食量偏低，身體攝入的能量達(dá)不到實驗要求，體重自然難以上漲，導(dǎo)致實驗失敗。因此研究者應(yīng)保持統(tǒng)計動物采食量的習(xí)慣，并記錄采食量曲線，如果某天采食量劇烈波動，就可以第一時間分析問題。
3. 對照組飼料的選擇
進(jìn)行不同類型的實驗時，可以有不同的飼料方案進(jìn)行選擇，但是實驗組與對照組的飼料原材料來源一定要一致，只有原材料來源一致，實驗數(shù)據(jù)才具有可比性。例如藥物藥效的測定實驗，添加藥物的實驗組飼料的基礎(chǔ)飼料必須和對照組飼料在原材料來源上保持一致，更嚴(yán)格來說，最好基礎(chǔ)飼料都使用同一批次的原材料生產(chǎn)。
在動物實驗過程中，實驗數(shù)據(jù)受到多個方面的影響，涉及飼養(yǎng)環(huán)境、飼料、溫度、飼養(yǎng)密度等原因。如果出現(xiàn)問題，應(yīng)針對性地分析并尋找解決方案。協(xié)同生物長期致力于高品質(zhì)的實驗動物飼料研發(fā)，為醫(yī)學(xué)動物實驗提供專業(yè)支持。
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常見2型糖尿病動物模型
建立2型糖尿病動物模型的主要發(fā)生機(jī)制是引發(fā)胰島素抵抗和（或）β細(xì)胞功能障礙為主，主要包括以下幾種模型：
① 單基因肥胖模型，如常見的ob/ob和db/db大小鼠，ZDF大鼠；
② 多基因肥胖模型；
③ 飲食誘導(dǎo)模型，主要指高脂飼料誘導(dǎo)型；
④ 其它非肥胖型模型；
⑤ 其它β細(xì)胞功能障礙模型
如下表所示，列舉了上述常見的糖尿病模型、誘導(dǎo)機(jī)制及應(yīng)用。
特點(diǎn)：需要自制或購買高脂飼料，飼料價格較高，但造模周期穩(wěn)定、且成模率高。
1. 單純高脂飼料誘導(dǎo)
高脂飼料誘導(dǎo)肥胖模型模擬人類2型糖尿病病因獨(dú)具優(yōu)勢，尤其模擬了肥胖合并糖尿病病人的發(fā)病特點(diǎn)，不會由于化學(xué)藥物誘導(dǎo)導(dǎo)致體內(nèi)重要器官受損，廣泛用于各種病因病理研究（肥胖癥、非酒精性脂肪肝、高血脂癥、心血管等疾病），特別是營養(yǎng)過剩和肥胖的2型糖尿病研究中。
2. 高脂飼料＋STZ
高脂飼料＋STZ誘導(dǎo)模型與單純高脂飼料誘導(dǎo)模型相比，造模周期縮短，成模率更高，多用于2型糖尿病藥物篩選和評價的動物模型。
下面以高脂飼料＋STZ誘導(dǎo)模型為例介紹其構(gòu)建方法（以ICR小鼠為例）：
① 8-10周齡小鼠投喂60%高脂飼料至少3周，誘導(dǎo)胰島素抵抗；
② 小鼠禁食5～12小時后，腹腔注射80 mg/kg（其他相似劑量也可以）的STZ誘導(dǎo)部分胰島素分泌障礙；
③ 一般2～3天檢測空腹血糖水平和餐后血糖水平，衡量血糖是否升高；
④ 體重相同、符合標(biāo)準(zhǔn)的糖尿病小鼠即可用于下一步實驗
成功構(gòu)建HFD/STZ小鼠并用于藥物篩選。 A,B分別是藥物治療8周內(nèi)的空腹血糖（FBG）和餐后血糖（PBG)
本文作者：
]]>為研究NAFLD的發(fā)病機(jī)制并找出治療方法，建立動物模型是至關(guān)重要的一步?？蒲腥藛T大多利用高脂飼料誘導(dǎo)大鼠建立NAFLD模型，但近幾年建立的NAFLD動物模型所采用的高脂飼料配方、建模周期均不一致，在研究方面具有不同的參考價值。本文對多種高脂飼料誘導(dǎo)大鼠建立NAFLD模型的方法進(jìn)行總結(jié)，如有疑問，歡迎與我們的技術(shù)團(tuán)隊討論。
飼養(yǎng)環(huán)境
環(huán)境是飼養(yǎng)實驗動物的必要條件之一，對于實驗動物的成活率有著很大的影響，在相關(guān)論文中對溫度和濕度幾乎都有詳細(xì)敘述，并強(qiáng)調(diào)了它的重要性?？紤]到NAFLD模型對環(huán)境并無特殊要求，所以科研人員一般采取了22±2℃，濕度50%-60%，12小時循環(huán)照明的普通飼養(yǎng)環(huán)境。
不過值得注意的是，大鼠對于環(huán)境的變化很敏感，因此要保證飼養(yǎng)環(huán)境各項指標(biāo)的穩(wěn)定。同時由于高脂飼料的緣故，大鼠的排泄物異味更重，需要及時更換墊料，飼料和飲水也需要滅菌處理，以免對實驗造成不必要的影響。
實驗大鼠的選擇
作為實驗的受體，大鼠的選擇十分重要，這不僅關(guān)系到實驗成本，也決定了建模的質(zhì)量及周期。
清潔級別
對于大鼠的清潔級別選擇，綜合多篇參考文獻(xiàn)，即便使用普通動物，對實驗結(jié)果也沒有明顯影響，但考慮到降低大鼠死亡率和實驗成本，清潔級別越高的大鼠無疑是越好的。
種類選擇
對于實驗大鼠的選擇主要有Wistar大鼠和SD大鼠。其中SD大鼠相對發(fā)育更快，適應(yīng)能力更強(qiáng)，更利于建模；缺點(diǎn)是價格較高，性格更兇猛。綜合考慮，我們認(rèn)為SD大鼠仍然是更好的選擇，但如果預(yù)算較少也可以選擇前者。
性別選擇
在查閱參考的十多篇文獻(xiàn)中，科研人員無一例外的選擇了雄性大鼠。由于成年的雌性動物代謝存在著明顯的周期性，這可能會對實驗造成影響，所以在大部分實驗中，科研人員更傾向于選擇雄性大鼠進(jìn)行實驗。
體重選擇
成年大鼠的體重可達(dá)300g，考慮到實驗時間一般為8-12周，我們認(rèn)為選取5-6周，即120g-200g的大鼠比較合適。值得注意的是，大鼠之間的體重差異必須小于10%，以免引入無關(guān)的變量，對實驗結(jié)果造成干擾。
高脂飼料配方
高脂飼料的配方無疑是NAFLD建模最關(guān)鍵的因素之一，合適的高脂飼料可以實現(xiàn)低死亡率低，快速建立模型的目標(biāo)。以下我們將對于高脂飼料的配方進(jìn)行詳細(xì)探討。
豬油含量
豬油含量是高脂飼料的核心，更高的豬油含量可以快速建立NAFLD模型，但會影響大鼠食欲及死亡率；豬油含量過低則會造成建模周期長，癥狀不明顯。在《高脂血癥非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立》中，科研人員雖然采用了42%豬油含量的高脂飼料在第8周建模成功，但個人認(rèn)為并不可取，因為如此高的豬油含量會大幅度提高大鼠死亡率。我們建議使用10%豬油含量的高脂飼料，可以在12-16周得到癥狀較明顯的NAFLD模型，而且在環(huán)境適宜的情況下，通常不會有大鼠死亡。如果要縮短建模周期，可以適當(dāng)提高豬油含量，但需要加入其它物質(zhì)來促進(jìn)吸收。
其它物質(zhì)
由于高脂飼料在適口性方面不如常規(guī)飼料，會導(dǎo)致大鼠采食量下降，在一些實驗中甚至出現(xiàn)了實驗組大鼠體重低于對照組的情況。所以很多研究人員在高脂飼料中添加了膽鹽（1%），以提高大鼠食欲，促進(jìn)消化吸收。同時也可以在飼料中添加膽固醇（1%-5%），以促進(jìn)脂肪肝的形成，縮短建模周期。
建模周期
建模周期和許多因素相關(guān)，不能一概而論。例如高脂飼料中的豬油含量對建模周期的影響就非常大。以下我們將討論使用10%豬油含量飼料前提下所需的建模周期。
在《高脂飲食誘導(dǎo)肥胖與肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立》中，研究人員在8周停止建模，解剖大鼠，表明建模成功，但癥狀較輕，大部分大鼠處于輕度和中度肝炎。而上文提到的研究中，建模時間長達(dá)16周，但癥狀明顯，大部分大鼠處于中度和重度肝炎。綜上所述，可以證明12-16周是比較合適的建模周期，具體時間可結(jié)合需要選擇。
木棒磨牙
在《非酒精性脂肪肝動物模型的建立與思考》中，科研人員考慮到高脂飼料質(zhì)地偏軟，所以為實驗組大鼠提供了木棒磨牙，結(jié)果確實提高了大鼠存活率，體重也是實驗組高于對照組的理想狀況。
剔除肥胖基因抵抗大鼠
《高脂飲食誘導(dǎo)肥胖與肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立》一文中探討了肥胖抵抗基因大鼠對于建立NAFLD模型的影響。實驗結(jié)果表明，在同樣的飼養(yǎng)條件下，肥胖抵抗基因大鼠的癥狀確實輕于普通大鼠，這不利于NAFLD模型的建立，所以在實驗前應(yīng)當(dāng)將其剔除。
總結(jié)
高脂飼料誘導(dǎo)大鼠建立NAFLD模型，應(yīng)選擇120-200g的雄性SD大鼠，剔除肥胖抵抗基因大鼠；環(huán)境溫度應(yīng)控制在22℃左右，濕度50%-60%；喂養(yǎng)10%豬油含量的高脂飼料，可添加膽鹽和膽固醇，在12-16周基本可以建模成功。
本文參考資料來源：
1.《高脂血癥非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立》劉慶豐/李中東/施孝金著；
2.《高脂飲食誘導(dǎo)肥胖與肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立》王瑩/王鴻/蔡東聯(lián)著；
3.《大鼠非酒精性脂肪肝模型構(gòu)建的方法探討》楊曉紅/徐富翠/余鴻著；
4.《非酒精性脂肪肝動物模型的建立與思考》王敏/閆曙光著
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研究發(fā)現(xiàn)，高飽和脂肪和高膽固醇的飲食方式與血液中膽固醇水平升高有關(guān)。和人類類似，西方飲食在特定的嚙齒類動物(例如小鼠、豚鼠)中也能引起LDL-C的升高和動脈粥樣硬化的發(fā)生。因此，動脈粥樣硬化動物模型是一個有價值的科研工具，既可以加深對發(fā)病機(jī)制的了解，也可以測試更多改善病癥的治療方法。一般而言，誘導(dǎo)動脈粥樣硬化的動物模型基本可以從三個方面著手：
（1）喂食富含膽固醇/脂肪的飼料
（2）編輯參與膽固醇代謝的基因
（3）引入額外風(fēng)險動脈粥樣硬化的因素，如糖尿病
誘導(dǎo)動脈粥樣硬化的模型動物主要有小鼠和兔子，其次是豬和非人類靈長類動物，這些動物模型都有其優(yōu)點(diǎn)和局限性。小鼠由于其繁殖快速，易于遺傳操作以及在合理的時間范圍內(nèi)監(jiān)測動脈粥樣硬化的能力，已成為研究實驗性動脈粥樣硬化的主要物種。
但普通品系的小鼠往往難以誘導(dǎo)動脈粥樣硬化疾病模型，原因是動物本身對膽固醇的吸收能力低，具有天然抵抗動脈粥樣硬化的能力。目前常用的小鼠有，載脂蛋白E缺陷和LDL受體基因敲除的小鼠。兔子雖然也較易形成動脈粥樣硬化，但其病理特征與人體的斑塊存在一定差異。
ApoE基因敲除小鼠和LDL受體基因敲除小鼠均是目前在動脈粥樣硬化研究領(lǐng)域中應(yīng)用最多的基因工程動物，一般采用高脂高膽固醇飼料進(jìn)行造模。研究表明，對于高脂高膽固醇飲食，ApoE基因敲除小鼠能夠比LDL受體敲除小鼠更快發(fā)展出斑塊。西方飲食飼料誘導(dǎo)ApoE基因缺陷小鼠出現(xiàn)動脈粥樣硬化早期病變僅需6周時間，而誘導(dǎo)LDLR基因缺陷小鼠出現(xiàn)明顯的動脈粥樣硬化病變可能需要12周時間。
]]>實驗方案：C57BL/6J雄鼠8周齡，分成兩組分別喂普通飼料以及高脂含膽固醇飼料（41%kcal脂肪，0.15%膽固醇）；持續(xù)24周后測體重、肝比重以及脂肪成分等。
實驗觀察：高脂含膽固醇飼料誘導(dǎo)小鼠，平均體重49 ± 3.6g，相比普通飼料喂養(yǎng)小鼠33.2 ±5.2 g，體重明顯增加。
HFC誘導(dǎo)小鼠肝脂肪比例是普通小鼠的3倍
氧化醇在對照或HFC誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)含量都較低且積累在脂肪組織內(nèi)
實驗結(jié)論：高脂含膽固醇飼料對C57BL/6J小鼠的肥胖形成、肝細(xì)胞炎癥以及脂肪組織氧化醇的形成起到誘導(dǎo)作用；其中小鼠肝細(xì)胞膽固醇是對照小鼠的2.3倍，與非酒精性脂肪肝炎的初步特征一致。飲食中增加的膽固醇，明顯堆積在肝細(xì)胞以及脂肪組織，并沒有馬上激發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)而產(chǎn)生大量的氧化醇堆積。調(diào)節(jié)高脂飼料中膽固醇的含量，可以作為誘導(dǎo)小鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)的一種手段，來研究例如糖尿病、動脈粥樣硬化等代謝疾病。
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