材料與方法
動(dòng)物及分組
雄性Wistar大鼠130只,隨機(jī)分成5組:哺乳期(3周齡)普通飼料組(I組)10只;哺乳期(3周齡)4%高鹽飼料組(II組)30只;哺乳期(3周齡)6%高鹽飼料組(III組)30只;哺乳期(3周齡)8%高鹽飼料組(IV組)30只;成年期(9周齡)8%高鹽飼料組(V組)30只。
檢測(cè)方法
實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)分別測(cè)各組大鼠體質(zhì)量。血壓測(cè)定:各組均于3周齡時(shí)測(cè)第1次鼠尾動(dòng)脈收縮壓,之后前6周每2周測(cè)1次,此后每4周測(cè)1次,直至25周齡。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
體質(zhì)量比較
喂養(yǎng)至25周齡,II~V組共有60只尾動(dòng)脈收縮壓超過140mmHg,視為血壓升高;另有60只血壓不高。高鹽血壓升高組、未升高組及普通飼料組大鼠體質(zhì)量比較如下。
高血壓模型成模率比較
哺乳期喂養(yǎng)4%、6%、8%高鹽飼料各組隨鹽濃度和喂養(yǎng)時(shí)間的延長,高血壓形成率逐漸升高,至25周齡分別為30%、50%、60%。8%高鹽飼料組喂養(yǎng)至21周和喂養(yǎng)至25周高血壓成模率無顯著差異(P>0.05)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
原發(fā)性高血壓是在一定的遺傳改變基礎(chǔ)上,由于多種環(huán)境因素的作用導(dǎo)致正常血壓調(diào)節(jié)機(jī)制失衡所引起的。鹽作為重要的環(huán)境因素,與高血壓的關(guān)系一直以來受到人們的關(guān)注,高鹽飼料誘導(dǎo)高血壓動(dòng)物模型在高血壓研究中起到重要作用。
本研究中自3周齡開始監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血壓,各組大鼠在7周齡前動(dòng)脈血壓隨周齡增高而增高,但無顯著差異,為生理性動(dòng)脈血壓升高階段;高鹽飼料組至25周齡的高血壓成模率分別為30%、50%、60%,隨鹽濃度的增高而增高。鹽導(dǎo)致血壓升高的機(jī)制目前尚不完全清楚,但腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的異常、血容量增加及細(xì)胞內(nèi)鈉和鈣的積聚被認(rèn)為是重要因素。
人體腎臟對(duì)鈉水平衡、血容量的調(diào)節(jié)能力不同,致個(gè)體對(duì)鹽負(fù)荷呈現(xiàn)不同的血壓反應(yīng),即存在“鹽敏感性”問題。1960年Dahl在大鼠研究中發(fā)現(xiàn),給動(dòng)物投喂高鹽飼料后呈現(xiàn)兩種不同的血壓反應(yīng),并具有遺傳性。本研究中高鹽高血壓大鼠較高鹽血壓正常及普通飼料大鼠體質(zhì)量增高,可能與高鹽負(fù)荷超過機(jī)體調(diào)節(jié)能力、血容量增加有關(guān)。
總之,本研究中8%高鹽飼料組的高血壓形成率最高,且成年期喂養(yǎng)至12周與哺乳期喂養(yǎng)至同樣周齡大鼠高血壓形成率無顯著差異,故我們認(rèn)為成年Wistar大鼠喂以8%高鹽飼料12周為高血壓造模時(shí)較為合理的鹽濃度及周期。
作者:于海榮/范洪亮/梅愛敏/任立群/景文麗/張樹峰,承德醫(yī)學(xué)院
]]>一、材料與方法
動(dòng)物及分組
20只初始體重130~160g的清潔級(jí)Wistar雄性大鼠,大鼠在動(dòng)物房適應(yīng)喂養(yǎng)3天后,根據(jù)體重和空腹血糖值隨機(jī)分為普通飼料組和高脂高糖飼料組。
高脂高糖飼料配方:大鼠基礎(chǔ)飼料68.8%、蔗糖10%、蛋黃粉10%、豬油10%、膽固醇1%、膽鹽0.2%;每組10只大鼠,由專人單籠喂養(yǎng),自由進(jìn)食飲水,房間溫度保持在20~25°C,濕度40%~60%,明暗周期為12小時(shí) ,實(shí)驗(yàn)周期42天。
指標(biāo)測(cè)定
每周兩次記錄飼料量、撒食量和剩食量,并稱量動(dòng)物禁食16小時(shí)后的體重,計(jì)算各組動(dòng)物的飼料總攝取量和食物利用率。喂養(yǎng)至第39天,禁食16小時(shí)后取尾血測(cè)大鼠空腹血糖值后,給各組大鼠灌胃210g/kg bw蔗糖溶液,于糖負(fù)荷后30分鐘、1小時(shí)和2小時(shí)取大鼠尾血測(cè)定即時(shí)血糖。
喂養(yǎng)至第42天,禁食16小時(shí)后稱體重,留取空腹尾靜脈血1ml,離心分離血清, -20°C保存,待測(cè)總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇等指標(biāo);頸椎脫臼法處死動(dòng)物,剖腹取體內(nèi)脂肪(雙側(cè)睪丸及雙腎周圍脂肪墊)用電子稱稱重,計(jì)算體脂/體重比。
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
大鼠生長曲線
如圖所示:兩組大鼠喂養(yǎng)一周后,體重即有顯著性差異(P< 0105)。隨著喂養(yǎng)時(shí)間的延長,差異越來越大,到第六周末,兩組大鼠的體重有顯著性差異(P< 0101)。
大鼠食物利用率
由表1可見,雖然實(shí)驗(yàn)組大鼠的進(jìn)食量低于對(duì)照組(P<0101),但體重增重和食物利用率均顯著性高于對(duì)照組(P<0101),說明高脂高糖飼料能促進(jìn)大鼠對(duì)食物的利用,增高體重顯著。
體脂濕重和體脂/體重比
由表2可見,實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔內(nèi)雙腎周圍和睪丸周圍的脂肪重量均顯著高于對(duì)照組(P< 0101),體脂/體重的比值也顯著高于對(duì)照組(P< 0105)。
血脂水平
由表3可見,實(shí)驗(yàn)組大鼠的血清甘油三酯稍低于對(duì)照組,但無顯著性差異(P> 0105);血清總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇均顯著高于對(duì)照組(P< 0105),而血清高密度脂蛋白膽固醇顯著低于對(duì)照組(P< 0101)。
糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)
本實(shí)驗(yàn)中給予大鼠高脂高糖飼料僅僅一周后,動(dòng)物體重即顯著高于對(duì)照組,食物利用率明顯上升,再次證明能量過剩是肥胖的根本原因。喂飼高脂高糖飼料僅僅6周時(shí)間,大鼠已出現(xiàn)中心性肥胖,腹腔內(nèi)脂肪(雙腎和睪丸周圍)顯著增加;血清總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇均顯著高于對(duì)照組,而血清高密度脂蛋白膽固醇顯著低于對(duì)照組;OGTT實(shí)驗(yàn)顯示糖耐量減低,血糖曲線下面積顯著高于對(duì)照組(P< 0101)。提示血糖正常的Wistar大鼠短期攝入高脂高糖飼料即可導(dǎo)致肥胖,并出現(xiàn)糖耐量減退和血脂代謝紊亂,具有導(dǎo)致糖尿病和心血管病的潛在危險(xiǎn)。
本文參考資料來源:
1.中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所《高脂高糖飼料對(duì)Wistar大鼠生長和糖脂代謝的影響》滿青青/何麗著;
2.世界衛(wèi)生組織《膳食、營養(yǎng)與慢性疾病》
3.世界衛(wèi)生組織《預(yù)防慢性病:一項(xiàng)至關(guān)重要的投資》
4.《中國居民營養(yǎng)與健康狀況調(diào)查報(bào)告》
5.《中國糖尿病防治指南》
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