在基礎(chǔ)生命科學(xué)研究領(lǐng)域,實(shí)驗(yàn)動物是必不可少的研究工具。其中,使用最廣泛的實(shí)驗(yàn)動物是小鼠,這是由于小鼠的基因組計劃基本完成、生理生化和發(fā)育過程與人類相似、基因改造技術(shù)成熟、繁殖能力強(qiáng)。而小鼠的飼養(yǎng)方法對于實(shí)驗(yàn)的成敗起著至關(guān)重要的作用,因此本文將探討可能對小鼠狀態(tài)造成影響的飼養(yǎng)因素。
內(nèi)在因素:
①遺傳:與供應(yīng)商索要質(zhì)量認(rèn)證報告,檢測結(jié)果是否符合相應(yīng)的遺傳背景。
②年齡與性別:年齡——選擇合適的年齡段;性別——前期查閱文獻(xiàn),分析性別與實(shí)驗(yàn)是否存在顯著關(guān)聯(lián)。
③營養(yǎng)條件:飼料成分不同影響小鼠后代性別比例以及代謝能力。如飽和脂肪酸比例高于碳水化合物的飼料影響后代雄鼠比例。
④自身免疫:免疫低下或缺陷小鼠對環(huán)境抵抗力差,需要合理設(shè)置飼養(yǎng)環(huán)境和條件。
⑤節(jié)律:晝夜及飲食節(jié)律與小鼠生理代謝關(guān)系極大,合理安排實(shí)驗(yàn)進(jìn)行周期。
⑥內(nèi)分泌狀況:避免引起小鼠的緊張感和壓力,導(dǎo)致內(nèi)分泌水平出現(xiàn)差異。
外在因素:
物理因素
①溫度:適宜溫度區(qū)間22℃-28℃。
②相對濕度:保持相對濕度適中,濕度過大,容易發(fā)生環(huán)尾現(xiàn)象。
③空氣交換:空氣交換頻率過快,給小鼠造成壓力和緊張感;過慢,導(dǎo)致環(huán)境氨氣濃度加大,容易滋生呼吸道病原微生物。
④噪音:會影響小鼠繁殖,發(fā)生食子現(xiàn)象。
⑤光源:定期調(diào)整籠位,避免由于接受光源強(qiáng)度不同造成生理,生殖,行為和代謝等差異。
⑥墊料:木屑——保溫性好,有利于筑巢,有氣味,吸水性差,產(chǎn)生氨氣較多;玉米芯——吸潮性強(qiáng),不保溫,糖尿病模型小鼠尿液多,容易對實(shí)驗(yàn)造成影響。
⑦籠具:注意雙酚A殘留,其強(qiáng)烈干擾小鼠的自身代謝水平。
化學(xué)因素
①外源性物質(zhì)影響:墊料中的黃曲霉、植物雌激素、內(nèi)分泌干擾物、重金屬、有機(jī)氯殺蟲劑、麻醉藥物等;飲食中潛在的飼料污染物,例如硝酸鹽,亞硝氨等;飲水中高氯酸,重金屬以及酸化的影響;輻照的劑量對飼料的成分影響。
②藥品:麻醉藥、鎮(zhèn)定藥和止痛藥;安樂死藥物;抗生素。
③信息素:嚙齒動物會產(chǎn)生揮發(fā)性的分子,如尿蛋白,類固醇,脂肪酸等來自不同種的動物氣味會影響到動物行為或生理的改變。抓取、采血以及注射應(yīng)激,均會誘發(fā)信息素的釋放。值得注意的是,信息素的釋放提醒我們做實(shí)驗(yàn)時避免對其它小鼠產(chǎn)生不必要的緊張和壓力。
微生物因素
細(xì)菌、病毒、寄生蟲,實(shí)驗(yàn)前應(yīng)確定實(shí)驗(yàn)動物房有完善的質(zhì)量監(jiān)控能力和措施,定期的質(zhì)量檢測很有必要。
良好的開端是成功的一半,在進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)的過程中應(yīng)懷感恩之心,尊重和善待實(shí)驗(yàn)動物,維護(hù)實(shí)驗(yàn)動物福利和倫理,遵循“3R”原則,科學(xué)、規(guī)范地使用實(shí)驗(yàn)動物。
]]>實(shí)驗(yàn)小鼠基本特征
實(shí)驗(yàn)小鼠是指遺傳背景明確或來源清晰,其攜帶的微生物及寄生蟲可控,可應(yīng)用于科學(xué)研究的動物。應(yīng)用最廣泛主要有近交系、封閉群等。其基本特征如下:
1. 體型小、壽命僅2~3年、繁殖力強(qiáng);
2. 性情溫順,膽小易受驚,一般不咬人;
3. 喜黑暗安靜環(huán)境,習(xí)慣于晝伏夜動;
4. 門齒終生生長,需啃咬堅硬物品磨牙。
為了獲得高品質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)小鼠和重復(fù)率高的科學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),良好的環(huán)境控制、標(biāo)準(zhǔn)化的飼料和科學(xué)化的飼養(yǎng)是必要條件。
生活環(huán)境(SPF級)
SPF級動物是指體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在的動物,即無傳染病的健康動物。與帶有多種傳染病的普通野生老鼠不同,實(shí)驗(yàn)小鼠均在特殊環(huán)境飼養(yǎng),SPF級小鼠也是國內(nèi)外廣泛使用的實(shí)驗(yàn)小鼠。
根據(jù)對微生物控制程度的不同,國際上將實(shí)驗(yàn)動物分為以下幾類:
SPF級動物優(yōu)點(diǎn):飼養(yǎng)室的空氣經(jīng)過初效、中效、高效三級過濾后進(jìn)入屏障環(huán)境,再經(jīng)過EVC籠具自帶過濾器后供動物呼吸,排除了傳染病和寄生蟲的干擾,因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,在生物醫(yī)學(xué)各個領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。
溫度與濕度
由于小鼠是沒有汗腺的,不耐熱,加上唾液分泌有限無法靠增加喘息來散熱,所以應(yīng)避免高溫天氣運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)小鼠。
飼養(yǎng)環(huán)境控制:溫度18~29℃;相對濕度40~70%;最好控制在18~22℃,濕度50~60%。保持溫度、濕度相對穩(wěn)定,日溫差不超過3℃,否則會直接影響小鼠的生長發(fā)育、生產(chǎn)繁殖、甚至導(dǎo)致小鼠發(fā)生疾病,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)小鼠飼料
對于天生愛磨牙的小鼠來說,有硬度的粗纖維食品是它們的最愛。不同種類的小鼠有不同的營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn),例如純系小鼠和種鼠的飼料所含蛋白質(zhì)成分高于一般小鼠,免疫缺陷小鼠的飼料蛋白成分通常也高于普通小鼠。
不同的小鼠飼料及飲食器(圖左為免疫缺陷小鼠飼料,圖右為普通小鼠飼料)
小鼠胃容量小,屬于多餐型動物,應(yīng)每周添加飼料3~4次。SPF級小鼠飲水應(yīng)通過高壓高溫方法滅菌,每周換水2~3次,保證飲水不斷。
→點(diǎn)擊查看實(shí)驗(yàn)小鼠飼料產(chǎn)品
實(shí)驗(yàn)小鼠日常管理
實(shí)驗(yàn)小鼠的飼養(yǎng)管理十分繁瑣,要求飼養(yǎng)人員具有高度的責(zé)任心,隨時檢查小鼠狀況,出現(xiàn)問題立即改正。
定時清潔衛(wèi)生和消毒
每周應(yīng)至少更換兩次墊料,墊料在使用前應(yīng)經(jīng)過高壓滅菌;保持飼養(yǎng)室內(nèi)外整潔,門窗、墻壁、地面無塵土;堅持每月消毒。
小鼠健康的日常檢查
通過外觀判斷小鼠健康的標(biāo)準(zhǔn)是:①食欲旺盛;②眼睛有神,反應(yīng)敏捷;③體毛光滑發(fā)亮,活動有力;④身無傷痕,尾不彎曲,無畸形;⑤排泄物呈黑色麥粒狀。
如果發(fā)現(xiàn)不健康小鼠,應(yīng)立即采取措施,例如取樣做常規(guī)檢測,對于患病小鼠應(yīng)及時處死,防止疾病傳染。
本文參考資料來源:邦耀實(shí)驗(yàn)室(
]]>